cdna文库和基因组文库的区别，从cdna文库和基因文库中获得的目的基因有什么不同？
对于真核生物来说，cdna文库里面获取的基因缺了内含子和非编码区等。cDNA是DNA转录成RNA再逆转录获得的，而在转录时，原DNA上的内含子和非编码区都会被加工切掉，只剩下原DNA编码区上的外显子对应的RNA片段，再逆转录的话，得到的cDNA就跟原DNA不同了。所以要基因组测序，提供cDNA文库是不够的
DNA重组的流程？
基本步骤
1 目的基因的获得
方法有：基因文库（cDNA文库、基因组文库）、PCR（放达效应）、人工合成
2 目的基因与载体连接
方法有：
——粘性末端——全同源性、定向克隆（两种酶切）
定向克隆可防止高背景的产生，因为全同源性会造成载体自连、重组子、目的基因自连三种可能，重组子可能还会出现正反插入的情况，使筛选过程复杂。
——平末端
酶切后也有可能产生平末端，也会出现高背景。
——人工接头——连接子（连入带粘性酶切位点的片断，再酶切）、普适子（一条链连上片断，成为粘性末端）、T-A克隆（PCR中使用的Taq聚合酶会根据模板延伸至后在链末尾加上一个A，可在克隆载体上加上T，使之连接）、同聚物加尾（末端转移酶加尾）
由于平末端连接效率比较低，可在其两端人工修饰
反应体系：目的基因、载体、T4连接酶、缓冲液
3 重组DNA导入受体（宿主）细胞——转化、转染、转导、感染
主要运用的是原核转化（导入感受态细菌，感受态：处于易于吸收外缘DNA的状态，方法：氯化钙法：DNA与其形成羟基-磷酸钙复合物，抗DNase水解）、真核转染。
4 筛选与鉴定
方法：
——遗传学（表形）——插入失活、蓝-白筛选、抗性基因（四环素Tet、氨苄青霉素Amp）
——酶切，在电泳（分子量、构想）
——PCR（特异性引物）
——核酸杂交（southern blot）
——免疫学方法（western blot）
——DNA测序（sanger、焦磷酸测序）
为什么将mrna反转录成cdna？
mRNA提取、分离纯化 从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DN
基因内启动子是什么？
有啊 基因组文库就是所有基因都有cDNA文库没有启动和子终止子
如何构建部分基因文库？
简单的说,就是把表达的mRNA先反转录为cDNA,再形成双链DNA,然后克隆到质粒.
